Projetos de formação discente

Projeto de pesquisa

Parecer da Comissão Científica

Projeto do CEBIMar

Dados do solicitante

Willian Reina Joviano

Natureza do projeto

Projeto de formação discente
Mestrado
José Roberto Machado Cunha da Silva
Por favor, selecione

Pesquisadores ou docentes associados

Andrews Krupinski Emerenciano
Letícia Palmeira Pinto
Amanda Ribeiro Rosa

Recursos

Bolsa do departamento destinado ao aluno.
CNPq

Descrição do projeto

Perfil transcricional de metalotioneínas, avaliação de parâmetros da imunidade inata e alterações histológicas do siri azul (Callinectes danae Smith, 1869) Crustacea- Portunidae, após exposição ao chumbo (Pb).
02-04-2018
31-12-2019
Metais como chumbo (Pb) podem constituir fonte de poluição ambiental difusa e de difícil controle e remediação. Espécies cosmopolitas como os siris azuis do gênero Callinectes sp. podem indicar a disponibilidade de contaminantes por meio de biomarcadores (alterações em diversos níveis do organismo), desde moleculares, imunológicos até histológicos. Diversos trabalhos verificaram a presença de metais em Callinectes sp. todavia, aspectos imunológicos e histológicos referentes à exposição destes metais tem recebido pouca atenção, principalmente para espécie-alvo deste estudo, o Callinectes danae. Considerando o exposto, o presente projeto tem por objetivo avaliar parâmetros imunológicos inatos, bem como alterações histológicas em siris azuis (Callinectes danae) expostos a 2 g/mL de Pb pelos períodos de 24h, 48h e 96h. Para tanto, o perfil da hemolinfa será avaliado com parâmetros de contagem diferencial de hemócitos, viabilidade celular, ensaios de fagocitose in vitro, capacidade germicida, análises da produção de ânion superóxido e perfil transcricional de metalotioneínas. Os parâmetros de alterações histológicas serão realizados por meio da mensuração de glicogênio do hepatopâncreas e pela contagem de células de muco das brânquias. Alterações morfológicas em ambos tecidos também serão consideradas. Além disso, será feita análise de bioacumulação de chumbo nos diferentes tecidos após exposição.
Metais, Callinectes, Chumbo, Poluição ambiental.
Coletas de siris azuis (Callinectes danae) serão realizadas de indivíduos na intermuda com aproximadamente o mesmo tamanho, sendo também mensurados quanto ao peso total, largura (desconsiderando os espinhos) e comprimento da carapaça. O sexo será identificado de acordo com Willians (1974), e o estágio de maturação pela forma e grau de aderência do abdômen aos esternitos torácicos. Logo após a coleta, 5 indivíduos serão sacrificados com objetivo de verificar previamente os níveis basais de Pb dos organismos no ambiente (controle ambiental). Os demais serão transportados vivos para o laboratório, onde permanecerão alimentados com dieta não-contaminada por 5 dias em aquários individualizados de 5 litros, preenchidos com água artificialmente salinizada (salinidade de 20-25permil;) de forma a eliminar o máximo de contaminantes que possam ter absorvido no ambiente (período de depuração). Após depuração, outros 5 indivíduos serão sacrificados para avaliação dos níveis de contaminação que os organismos atingiram após depuração (grupo depuração). Os demais siris (n=5 por grupo) serão individualmente expostos a 2 g/mL em água artificialmente salinizada 20-25 . As concentrações serão obtidas através de uma solução estoque (solução ultrapura de chumbo inorgânico - PerkinElmer 10000 mL), em grupos de diferentes tempos (24h, 48h e 96h com seus respectivos controles). Hemolinfa, brânquias, hepatopâncreas e músculos serão coletados para analises imunológicas, histológicas e moleculares referentes a exposição.
Coletas e exposições no Cebimar (Jan-2018 a Set-2018); Análises dos parâmetros imunes (Mai-2018 a Set-2018); Análises dos parâmetros histológicos (Set-2018 a Dez-2018); Análises do perfil transcricional de metalotioneínas (Dez-2018 a Març-2019); Análises estatísticas e elaboração da dissertação (Març-2019 a Agost-2019).



Solicitações

Laboratório com espaço para acomodação de aquários e realização de ensaios de biologia celular.
Aquários, água do mar, conchas marinhas, vidrarias volumétricas, ácido nítrico, etanol, balança, aquecedor com agitador magnético. No demais, equipamentos serão levados.
Siri azul (Callinectes danae).
Nos manguezais próximos ao CebiMar
Nenhuma condição ambiental especial.
Não
  • Abril
  • Maio
  • Junho
10
3