Projeto de pesquisa

Não haverá necessidade de uso de infraestrutura do CEBIMar. Cerca de 30 amostras (2ml) foram coletadas no canal de São Sebastião entre dezembro de 2014 a abril de 2015, fixadas em glutaraldeído e congeladas em nitrogênio líquido. As amostras em tréplicas foram mantidas em ultra-freezer até a análise. Para as réplicas desta proposta, foi utilizado o citômetro de fluxo FACScalibur para a contagem das células do picoplâncton com emissão de um laser emitido em 480 nm de comprimento de onda, As amostras foram corridas em High Speed (aproximadamente 60 µl/min) e voltagem 5,86 V. Geralmente, são adicionados 10 µl para cada 600 µl da amostra de uma solução com “beads yellowgreen” com 0.92 μm de diâmetro (Polysciences) de látex para controle de fluxo. Synechococcus são detectados pelos sensores de fluorescência laranja e fluorescência vermelha (GASOL; MORÁN, 2015). Após os dados serem transmitidos para o computador, número de células por ml de Synechococcus é obtido com a utilização do programa FlowJo que transforma as informações em citogramas e tabelas para, posteriormente, serem calculados os valores das quantidades de células. Esses valores serão comparados a aqueles obtidos pelo citômetro de fluxo utilizado no CEBIMar (BD C6) para análise de duas das 3 réplicas. Esse último é considerado inferior para a detecção de Synechococcus em comparação ao FACScalibur. As abundâncias encontradas em cada coleta, serão comparadas a estimativas de biomassa fitoplanctônica feitas com analises da concentração de clorofila-a medidas por fluorimetria (cortesia de Camilla Bellini).