Projeto de pesquisa

O projeto focará em quatro eixos: (1) Coleta, separação, identificação e caracterização dos esferulócitos, (2) Identificação da natureza química das esférulas citoplasmáticas, (3) estudo das funções fisiológicas e (4) Desenvolvimento e origem. Para o objetivo 1, será retirado líquido celomático com todas as subpopulações de celomócitos e em seguida as populações celulares serão separadas por gradiente de densidade, resina de troca iônica e citometria de fluxo. A identificação e caracterização se dará por citologia (citocentrifugados), microscopia eletrônica de transmissão e de varredura, observando-se a morfologia do núcleo e do citoplasma. Para o item 2, será realizada espectrometria de massa das subpopulações isoladas. A parte fisiológica (3) analisará a citotoxicidade: capacidade dos celomócitos em lisar eritrócitos de camundongo; atividade bactericida: capacidade de inibção do crescimento de culturas de Escherichia coli; Regeneração: presença e possível papel dos celomócitos durante o processo de regeneração; Transporte de oxigênio: análise da dinâmica dos esferulócitos em indivíduos submetidos a hipóxia e hiperóxia. Para o item 4, os organismos serão criados até o início da fase juvenil. Será realizada fecundação in vitro, criação das larvas até a metamorfose e as análises serão realizadas por cortes histológicos.