Projeto de pesquisa

AMOSTRAS E COLETA. Para o desenvolvimento do estudo serão utilizadas 5 espécies focais de bivalves, i.e., Arca imbricata (Arcidae), Isognomon bicolor (Isognomiidae), Ostrea equestris (Ostreidae), Perna perna (Mytilidae) e Limaria fragilis (Limidae), que representam linhagens de cada um dos principais clados de Pteriomorphia. A escolha das espécies é baseada em critérios de amostragem taxonômica, presença de estruturas sensoriais na margem do manto e acessibilidade para coleta. A amostragem abrange as três condições sensoriais possíveis na margem do manto dos Pteriomorphia, i.e., apenas ocelos presentes (Arcidae), apenas tentáculos presentes (Limidae, Mytilidae e Ostreidae), e presença de ocelos e tentáculos (Pectinidae e Pteriidae). Todas as espécies são epifaunais, ou seja, são bivalves que habitam a superfície do substrato, preferencialmente consolidado, como rochas e conchas. Além disso, apresentam distribuição em águas rasas, do infra- ao mesolitoral. Espécimes de cinco espécies focais serão coletados no Canal de São Sebastião (SP) e coletas complementares estão previstas no cronograma do projeto. Além disso, caso a obtenção de indivíduos das espécies listadas seja inviabilizada por condições naturais, outras espécies das famílias correspondentes, e com as mesmas características ecomorfológicas, podem ser facilmente coletadas para a condução do estudo.
MICROSCOPIA E ESTUDO ANATÔMICO. Para caracterização anatômica dos órgãos sensoriais, amostras serão analisadas por meio de microscopia integrativa, i.e., histologia, microscopia eletrônica de varredura (MEV) e microscopia eletrônica de transmissão (MET).
TRANSCRIPTOMA COMPARATIVO E FUNCIONAL. Para análise da expressão diferencial de transcritos via RNA-seq, serão utilizadas amostras de tecidos da margem do manto que apresentam órgãos sensoriais (como ocelos e tentáculos) para comparações intraespecíficas, i.e., utilizando tecido do músculo adutor como controle. Após aclimatação e dissecção dos animais, amostras de todos os tecidos-alvo, i.e., ocelos, tentáculos e músculos adutores, serão imediatamente fixadas em RNALater. Etapas seguintes incluem: extração de mRNA, construção de biblioteca (cDNA), sequenciamento por plataforma NGS, montagem (de novo) dos transcriptomas, anotação funcional, identificação de candidatos a opsinas e quimiorreceptores e reconstruções filogenéticas.