Projeto de pesquisa

Seis colônias da espécie Mussismilia hispida foram coletadas por mergulho autônomo no arquipélago de Alcatrazes, localizado no estado de São Paulo, Brasil. Após a coleta, cada colônia foi dividida em seis fragmentos e aleatoriamente alocados em seis aquários, onde foram mantidas sistema aberto de água do mar. A incidência de luz foi mantida constante em 100 PAR, com um fotoperíodo de 12 horas de luz e 12 horas de escuro, enquanto a temperatura foi controlada (ApexSystems) em 26ºC via termostatos e chiller.

As análises foram realizadas em sete momentos distintos: tempos 0, 3, 7, 14, 21, 28 e 42 dias de aclimatação. O dia 0 correspondeu à data de chegada (referência de campo), enquanto o dia 42 representou o período máximo de aclimatação dos animais. A avaliação da eficiência fotossintética, a captura de fotos e a respirometria/fotossíntese foram conduzidas consistentemente nos mesmos horários para se evitar um efeito do ciclo circadiano. Os fragmentos selecionados em cada dia foram escolhidos aleatoriamente, assegurando a inclusão de todos os seis genótipos em cada análise fisiológica e bioquímica.

O experimento iniciou com a avaliação da eficiência fotossintética. As luzes foram ajustadas para operar a 20% de sua capacidade e a medição da fluorescência foi determinada em três pontos distintos de cada fragmento, utilizando-se de um fluorímetro. Em seguida, foram tiradas fotografias dos corais com uma tabela de cores (RGB) e uma fita métrica para análises posteriores da coloração e da área. Para a realização da respirometria/fotossíntese, os corais foram cuidadosamente envoltos em uma massa atóxica (Redelease) a fim de evitar interferências de epibiontes presentes no esqueleto dos corais quanto ao consumo ou produção de oxigênio. Os fragmentos foram isoladamente incubados em câmaras de acrílico conectadas a fibras ópticas de temperatura e oxigênio (Pyroscience) e mantidas em uma mesa eletromagnética submersa em temperatura constante (26 oC). A mesa movimentava agitadores magnéticos dentro dos respirômetros a fim de evitar a estratificação do oxigênio na água. Os corais foram submetidos a um período de 2 horas de luz (fotossíntese líquida) seguido por 40 minutos de escuro (respiração).

Após as análises supra que dependiam dos animais vivos (eficiência fotossíntética e metabolismo/fotossíntese), os fragmentos de corais foram aliquotados, armazenados em tubos Eppendorf e congelados a -80ºC para posteriores análises relativas à simbiose e bioquímica. Foram determinadas a densidade de simbiontes e o conteúdo de clorofila a, bem como a peroxidação lipídica como proxy de estresse oxidativo. Os dados foram normalizados pelo conteúdo de proteína total das amostras.